EZ-Catalase assay kit

EZ-Catalase assay kit

Oxidative Stress assay kit

Catalog No.

Assay

DG-CAT400

400 tests

Protocol
Brochure

Catalase는 대표적인 항산화 효소로 생존하는 대부분의 동•식물에 존재하며, 일반적으로 호기성 물질대사에서 생성되는 독성물질인 H2O2나 활성산소종 (Reactive Oxygen Species, ROS)의 분해작용에 관여하는 것으로 알려져 있습니다.

 

이러한 catalase가 관여하는 분해작용에는 촉매 활성(Catalytic activity)과 과산화 활성(peroxidatic activity) 작용이 있습니다.

 

촉매 활성에서는 두 분자의 H2O2를 한 분자의 산소와 두 분자의 물로 전환되는 반응을 촉진시키는 역할을 담당하며, 과산화 활성에서는 알코올의 저분자화 반응에서 전자공여체의 역할을 수행하고 있습니다. 인체에서는 간, 신장, 적혈구에서 많이 존재하며, 주로 H2O2 분해 반응에 관여하는 것으로 알려져 있습니다.   

 

EZ-Catalase assay kit는 높은 민감도와 간단한 실험방법을 통해 정확한 catalase의 측정이 가능한 제품으로 50mU/㎖의 적은 양의 catalase 측정이 가능하며, 형광과 흡광 측정 방법 모두 사용 가능합니다.

Detection Method

  • Colorimetric - Absorbance at 560 nm

  • Fluorometric – Excitation : 530~560 nm / Emission : 580~590 nm (Optimal Ex/Em = 540/590)

Sample type

   Tissues, plasma, serum and other biological fluids, cell lysates, tissue extracts

Assay type

   Enzyme activity

Storage Condition

   -20 ℃

Kit Components

  • Oxi-Probe (MW=257) : 2 vials

  • Dimethylsulfoxide (DMSO), anhydrous : 500 ㎕

  • Horseradish peroxidase (HRP, 20 U) : 1 vial

  • Hydrogen peroxide (H2O2, 3 %, 0.88 M) : 500 ㎕

  • 5X Reaction Buffer (pH7.5, 0.5 M) : 20 ㎖

  • Catalase (100 U) : 1 vial

Fig. Assay Principle

Sample안의 Catalase는 H2O2를 물(H2O)과 산소(O2)로 분해 합니다.

이때 분해되는 H2O2는 catalase의 활성과 비례하며,

분해되지 않고 남은 H2O2는horseradish -peroxidase(HRP)가 존재하는 상태에서 Oxi-Probe 시약과 1:1로 반응하게 되고,

이때 산화적 형광 생성물인 resorufin이 생성되게 됩니다.

이러한 반응의 결과에서 resorufin의 양이 적다는 것은 catalase 활성 증가를 의미하며,

catalase의 활성이 좋을수록 형광 또는 흡광 측정값이 낮아지게 됩니다.